前沿进展
目前以过继性T细胞疗法（ACT）和免疫检查点阻断（ICB）为代表的肿瘤免疫疗法主要依赖于诱导1型免疫，尽管在临床上取得了革命性突破，却仍然面临响应率低和复发率高的挑战。近期Nature发表两篇背靠背论文，指出增强2型免疫与1型免疫的协同将为长效抗肿瘤带来新曙光。
其中题为“The type 2 cytokine Fc–IL-4 revitalizes exhausted CD8+ T cells against cancer”的论文，聚焦于临床前机理研究，发现2型免疫竟然能够唤醒抗肿瘤的“沉睡战士”——终末耗竭CD8+ T细胞（TTE），使其重新焕发强大的抗肿瘤活力。
研究结果
作者首先制备了小鼠IL-4（一种典型的2型免疫细胞因子）与突变的IgG2a Fc融合的重组蛋白（Fc-IL-4），其生物活性与IL-4相当，同时半衰期大大延长。
-
在黑色素瘤YUMM1.7-OVA模型中，联合OT1细胞疗法实现100%肿瘤清除；
-
结肠癌MC38-HER2模型中联合HER2-CAR-T细胞疗法实现86%肿瘤清除；
-
MC38模型中联合PD-1加CTLA-4的ICB治疗实现100%肿瘤清除；
-
人源Fc–IL-4联合CD19-CAR-T细胞疗法，在Raji人淋巴瘤的NSG小鼠模型中实现了75%的肿瘤清除。
图1 Fc-IL-4在结肠癌MC38小鼠模型中增强ICB疗法的功效并提供持久保护。从上至下依次为实验时间表、平均肿瘤生长曲线、Kaplan-Meier生存曲线，以及初次和二次接种肿瘤后的生存曲线。
图2 体内选择性清除免疫细胞揭示Fc-IL-4对抗肿瘤活性的增强依赖于CD8+细胞。
图3 敲除LDHA之后的OT1细胞疗法不受Fc-IL-4增强。
研究方法亮点
除了突破性的结论，这项研究还在实验中大量地使用了小鼠模型和功能级抗体，获得了翔实的临床前研究数据。文章一共使用了10种来自Bio X Cell的高品质功能级抗体，覆盖四大类应用，贯穿研究的各个阶段，为研究人员提供了可靠而高效的工具：
阻断Blocking
论文首次投递Nature的稿件中只检查了Fc-IL-4联合ACT疗法的效果，有审稿人提出测试联合ICB的效果，作者使用PD-1抗体（RMP1-14，#BE0146）和CTLA-4抗体（9H10，#BE0131）在结肠癌小鼠模型中体内阻断，证实Fc-IL-4对ICB同样具有抗肿瘤增强效应（上图1）。
清除Depletion
为了探究Fc-IL-4作用的具体细胞类型，作者分别使用Bio X Cell的anti-CD8（YTS 169.4，#BE0117）、anti-CD4（YTS 177，#BE0003-3）、anti-NK1.1（PK136，#BP0036）和anti-Ly6G/Ly6C（NIMP-R14，#BE0320）抗体在小鼠体内清除不同免疫细胞，并以IgG抗体（LTF-2，#BP0090）作为对照，发现只有清除CD8+ T细胞完全消除Fc-IL-4对ACT的增强作用（上图2）。
中和Neutralization
第一轮审稿意见的另一个问题是，既然Fc-IL-4能够增强抗肿瘤，那么内源IL-4在肿瘤免疫中有什么功能？为了回答这个问题，作者用IL-4抗体（11B11，#BE0045）在小鼠体内中和内源IL-4，观察到对疗效基本没有影响，可能的原因是治疗用的Fc-IL-4浓度高达内源IL-4的103-106倍。
激活/刺激Activation/Stimulation
CD3和CD28的抗体组合是体外激活T细胞的常用方案，这篇论文在构建HER2-CAR-T细胞和基因编辑T细胞时多次使用CD3抗体（17A2，#BE0002）加CD28抗体（PV-1，#BE0015-5）的方案来激活T细胞（比如上图3）。同样的CD3抗体还被用于离体诱导TTE，为深入的分子机制研究提供了关键的分析对象。
下表是这篇论文使用的Bio X Cell抗体汇总。
如需了解以上Bio X Cell抗体产品的更多信息，或有购买/试用需求，欢迎联系BioXCell授权代理商欣博盛生物。
参考文献
Feng, B., Bai, Z., Zhou, X., Zhao, Y., Xie, Y., Huang, X., Liu, Y., Enbar, T., Li, R., Wang, Y., et al. (2024). The type 2 cytokine Fc–IL-4 revitalizes exhausted CD8+ T cells against cancer. Nature 634, 712-720. 10.1038/s41586-024-07962-4.